尿液放置20分钟后可能因细菌滋生和hCG变化影响检测结果，但并非一定无效，怀孕时间长时仍可能检测出。建议用新鲜晨尿并严格按说明书操作，可重复检测或进行血检。
一般验孕棒或验孕试纸的原理是通过检测尿液中的人绒毛膜促性腺激素水平来判断是否怀孕，hCG是由胎盘分泌的一种激素，在怀孕后会逐渐升高。通常验孕棒和验孕试纸要求使用新鲜的晨尿或在规定时间内收集的尿液进行检测，如果尿液放置了20分钟，其有效性可能会受到一定影响。尿液放置时间过长可能会导致细菌滋生，细菌的繁殖可能会改变尿液的成分，从而影响检测结果的准确性。细菌代谢产物也可能与检测试剂发生反应，产生假阳性或假阴性结果。尿液中的hCG可能会随着时间的推移而发生变化，虽然hCG在尿液中的稳定性相对较高，但长时间放置可能会导致其浓度发生轻微改变。这种变化可能不足以引起明显的检测结果差异，但在某些情况下可能会使原本微弱的阳性结果变得难以判断或出现假阴性结果。但这并不意味着尿液放置20分钟后验孕一定无效，有时即使尿液放置了一段时间，仍然可以检测出怀孕。如果怀孕时间较长，hCG水平较高，即使尿液放置了20分钟，也可能会显示出明显的阳性结果。建议使用新鲜的晨尿进行检测，晨尿中的hCG浓度相对较高，检测结果更可靠，严格按照验孕棒或验孕试纸的说明书进行操作，注意使用正确的方法收集尿液，并在规定时间内进行检测，如果对验孕结果有疑问，可以重复检测或到医院进行血液检测。血液检测hCG水平更加准确，可以为判断是否怀孕提供更可靠的依据。
常见的验孕方式有哪些
1、验孕棒：将验孕棒的吸尿孔一端浸入尿液中，注意不要超过最大标志线，停留几秒钟后取出平放。一般在几分钟后观察结果。如果出现两条明显的红线，通常表示怀孕。如果只有一条对照线，则为未怀孕，若出现一深一浅两条线，可能是怀孕早期或者检测结果不确定，可隔几天再次检测。
2、验孕试纸：与验孕棒类似，将试纸浸入尿液中，或者直接将尿液滴在试纸上，等待一定时间后观察结果。根据试纸上出现的线条情况判断是否怀孕，原理与验孕棒相同。
3、血液检测：需要到医院抽取静脉血，由专业人员进行检测，通过检测血液中的人绒毛膜促性腺激素水平来确定是否怀孕，血hCG检测比尿液检测更准确，能更早地检测出怀孕。